| [Vizitator (112.0.*.*)]răspunsuri [Chineză ] | Timp :2022-05-03 |  Operațiunea de spectrometrie a enzimelor gelatinoase
Procesul de bază al profilării enzimatice este de a separa mai întâi proba prin electroforeză SDS-poliacrilamidă (SDS-PAGE, conținând 0,1% gelatină) și apoi de a restabili activitatea MMP-2 și MMP-9 în probă într-un sistem tampon cu ioni metalici divalenti, hidrolizează gelul în gel în pozițiile lor de migrare respective și, în cele din urmă, patează gelul cu Coomassie albastru strălucitor și apoi decolorează, iar benzile albe pot apărea pe fundalul albastru, iar rezistența benzilor este direct proporțională cu activitatea MMP-2 și MMP-9.
Principiul re-compatibilității: În timpul electroforezei, SDS se leagă de MMP-urile din probă (desigur, legarea reversibilă), distruge legăturile sale de hidrogen, legăturile hidrofobe și face ca MMP-urile să nu își poată juca rolul în descompunerea gelatinei și numai atunci când adezivul este plasat în Trition pentru a elua (cel mai bine este să-l puneți pe un agitator, 30min / timp, faceți 2 ori sau 15min / timp, de 4 ori. Nu este potrivit să stai nemișcat în Trition. ) , deoarece SDS este eliminat prin legarea Trition, MMP-urile sunt întinerite. |
|
